作者boblu (六百)
看板Biotech
标题Re: [求救] 免疫萤光的步骤
时间Thu Dec 30 14:32:55 2010
※ 引述《Bluegnga (蓝)》之铭言：
: 目前我在做血色素的萤光反应
: 我的一抗是rabbit 二抗是goat的
: 想请问大家一抗二抗的浓度大家一般都是怎麽配的呢?
这真的很难说
原则是看卖抗体的厂商给的区间
: 还有BSA做blocking,我看BSA溶液约在2-5%
: 不过我是买粉状的BSA 想请问2-5%是怎样的算法?
重量体积浓度
2g 溶於 100mL 就是 2%
: 另外我看在做抗体反应时 有些是写放在室温 有些则写放在约37度
: 我想抗体是动物血清中萃取出的
: 是否放在温度较近於体温的温度活性会比较高呢?
基本 没错
但是免疫染色大多时候追求的并不是抗体活性高而是专一性好
多少温度 多少时间 真的也是 case by case
: 然後用PBS冲洗完应该要怎麽用乾呢?用氮气吹还是用无尘纸吸乾呢?
免疫萤光没有道理要 "用乾"
随时注意用湿才对
: 还有曝光时间有比较推荐的吗?
也是 case by case
（删）
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 97.92.0.42
1F：推 oplz:immunofluorescence 要怎麽在暗房用底片沾?? 12/30 15:15
我傻
前面才刚说萤光磷光要分清楚现在自己马上昏头 /囧\
※ 编辑: boblu 来自: 97.92.0.42 (12/30 15:36)