作者mzac1b (Goodday)
看板Biotech
標題[閒聊] real time PCR 每反應所需最低總體積?
時間Sun Dec 26 13:00:46 2010
現在我用power SyBR, ABI 的儀器在做 real time PCR
由於每個反應總體積越大花錢當然越多
所以想問說實驗可以進行的最低總體積是多少?
反應總體積會影響實驗結果嗎?
目前我用每個反應總體積20ul
感謝您的分享~~
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 210.60.122.14
1F：推 nixo:10ul應該還可以，自己試試看吧。 12/26 14:46
2F：推 mattmatt:10ul影響不大 相對定量的話沒甚麼關係 12/26 15:32
3F：→ NKTcell:我有問過原廠 體積建議不要太小 12/26 15:48
4F：推 hek:如果想省錢,自己買sybr green配reaction mix是最省的. 12/26 18:22
5F：推 spirithorse:我們LAB用 total 15 ul SYBER GEEN 7.5 ul 12/26 20:31
6F：推 pocession:理論上來說，體積愈小，pipetting error的影響會愈大 12/26 23:07
7F：→ pocession:如果只是用來判斷陽性或陰性的話，12左右都ok 12/26 23:08
8F：→ pocession:但如果是用來精確定量的話，最好還是用25以上，減少變異 12/26 23:09
9F：→ chiasaiqueen:看用什麼plate。96well的有人用到10 ul total 12/27 17:20
10F：推 hajimels:我們實驗室 96-well=>10ul 384-well=>6ul 12/28 13:31
11F：→ joey0422:我也都減半使用 ok的 (lightcycler) 12/29 11:06
12F：推 bioowen:我們Lab也是用10ul 12/30 01:10