作者mzac1b (Goodday)
看板Biotech
标题[闲聊] real time PCR 每反应所需最低总体积?
时间Sun Dec 26 13:00:46 2010
现在我用power SyBR, ABI 的仪器在做 real time PCR
由於每个反应总体积越大花钱当然越多
所以想问说实验可以进行的最低总体积是多少?
反应总体积会影响实验结果吗?
目前我用每个反应总体积20ul
感谢您的分享~~
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◆ From: 210.60.122.14
1F：推 nixo:10ul应该还可以，自己试试看吧。 12/26 14:46
2F：推 mattmatt:10ul影响不大 相对定量的话没甚麽关系 12/26 15:32
3F：→ NKTcell:我有问过原厂 体积建议不要太小 12/26 15:48
4F：推 hek:如果想省钱,自己买sybr green配reaction mix是最省的. 12/26 18:22
5F：推 spirithorse:我们LAB用 total 15 ul SYBER GEEN 7.5 ul 12/26 20:31
6F：推 pocession:理论上来说，体积愈小，pipetting error的影响会愈大 12/26 23:07
7F：→ pocession:如果只是用来判断阳性或阴性的话，12左右都ok 12/26 23:08
8F：→ pocession:但如果是用来精确定量的话，最好还是用25以上，减少变异 12/26 23:09
9F：→ chiasaiqueen:看用什麽plate。96well的有人用到10 ul total 12/27 17:20
10F：推 hajimels:我们实验室 96-well=>10ul 384-well=>6ul 12/28 13:31
11F：→ joey0422:我也都减半使用 ok的 (lightcycler) 12/29 11:06
12F：推 bioowen:我们Lab也是用10ul 12/30 01:10