作者m9812 (Optometry Baby)
看板Biotech
標題[求救] 這...我想是神的旨意吧!!
時間Tue Dec 21 23:09:00 2010
我不是要問實驗步驟的問題，不過又跟實驗有關係，囧rz
小弟我碩士班畢業後當研究助理，不過遇到了一個小小的trouble
最近再做細胞培養，細胞只要解凍完後繼代就會養不起來(其實就是汙染了)
前面的幾次汙染都有抓到原因，不過也花費了好多時間，因為這邊實驗室都用
75t養細胞(貼的細胞)，然後從上禮拜開始連續兩天都發現75t內裝了10ml的培養基
漏了出來，第一次發現不以為意，想說可能是蓋子鎖太緊或是沒鎖緊的問題進而產生
壓力差???所以導致其中一盤75t內的培養基都跑出來漏光光了(當初還有想到
是75t有裂掉之類的問題，不過看一看也沒事)，不過當我補滿培養基後，隔天在觀察
細胞成長狀況，另一盤75t也漏出培養基了，(10ml的雞也跑光了,囧)，重點是
我想問各位大大，有沒有遇過類似的問題，因為水盤水滿多的，而這漏出來20ml的培養基
搞得incubator酸酸臭臭的，細胞也又開始污染了，囧...
如果這是"正常現象"有人能夠經驗分享嗎?!我是想問那個培養雞出走，是"正常"的嗎??
我臉都綠了...每天開incubator像是對樂透彩 = =
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 58.115.122.217
1F：→ NKTcell:你看你有沒有得罪誰吧 75T要medium全部漏光也很難 12/21 23:16
2F：→ NKTcell:如果耗材一切OK 人為因素比較大 12/21 23:16
3F：→ NKTcell:有個TEST方式 以下次養的時後多養幾盤分別標上不同人的 12/21 23:17
4F：→ NKTcell:別讓人看出來是你的細胞 12/21 23:17
5F：→ NKTcell:另外就是check 之前凍的細胞的確是ok的 12/21 23:18
6F：→ m9812:感謝你的回答 不過整個實驗室只有我在弄細胞, 所以INCUBATOR 12/21 23:21
7F：→ m9812:這幾天都是空的,囧...之前凍的細胞 老闆是說都ok 我解凍完 12/21 23:21
8F：→ m9812:也沒異常, 不過只要SUBCULTURE就汙染PBS, MEDIUM都CHECK過了 12/21 23:22
9F：→ m9812:不是很想懷疑TRYPSIN...以及我的操作手法, 但是75T MEDIUM漏 12/21 23:23
10F：→ m9812:光, 我看要請李組長出來看看了 囧RZ 12/21 23:24
11F：推 datro:75T是哪一間的？ 拿的時候瓶口稍微朝上 12/21 23:47
12F：→ datro:然後 INCUBATOR 鐵盤要清 水盤要用滅菌水更新 不然還是會掛 12/21 23:48
13F：推 oplz:就改用 dish 養就好了 12/22 04:50
14F：推 aceliang:是漏到流出來還是蒸散？incubator溫度跟CO2濃度正確？ 12/22 09:23
15F：→ NKTcell:只有你在養細胞? 實驗室只有你一個人? 12/23 17:36
16F：推 damyr:你繼代培養時有沒有為了把細胞打散而敲T75? 12/23 21:29
17F：→ damyr:以前實驗室用敲擊的方式把細胞敲散繼代培養，學姊都沒問題 12/23 21:30
18F：→ damyr:結果我一去就敲裂好幾個，T75還蠻不耐撞的 12/23 21:31