作者m9812 (Optometry Baby)
看板Biotech
标题[求救] 这...我想是神的旨意吧!!
时间Tue Dec 21 23:09:00 2010
我不是要问实验步骤的问题，不过又跟实验有关系，囧rz
小弟我硕士班毕业後当研究助理，不过遇到了一个小小的trouble
最近再做细胞培养，细胞只要解冻完後继代就会养不起来(其实就是污染了)
前面的几次污染都有抓到原因，不过也花费了好多时间，因为这边实验室都用
75t养细胞(贴的细胞)，然後从上礼拜开始连续两天都发现75t内装了10ml的培养基
漏了出来，第一次发现不以为意，想说可能是盖子锁太紧或是没锁紧的问题进而产生
压力差???所以导致其中一盘75t内的培养基都跑出来漏光光了(当初还有想到
是75t有裂掉之类的问题，不过看一看也没事)，不过当我补满培养基後，隔天在观察
细胞成长状况，另一盘75t也漏出培养基了，(10ml的鸡也跑光了,囧)，重点是
我想问各位大大，有没有遇过类似的问题，因为水盘水满多的，而这漏出来20ml的培养基
搞得incubator酸酸臭臭的，细胞也又开始污染了，囧...
如果这是"正常现象"有人能够经验分享吗?!我是想问那个培养鸡出走，是"正常"的吗??
我脸都绿了...每天开incubator像是对乐透彩 = =
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◆ From: 58.115.122.217
1F：→ NKTcell:你看你有没有得罪谁吧 75T要medium全部漏光也很难 12/21 23:16
2F：→ NKTcell:如果耗材一切OK 人为因素比较大 12/21 23:16
3F：→ NKTcell:有个TEST方式 以下次养的时後多养几盘分别标上不同人的 12/21 23:17
4F：→ NKTcell:别让人看出来是你的细胞 12/21 23:17
5F：→ NKTcell:另外就是check 之前冻的细胞的确是ok的 12/21 23:18
6F：→ m9812:感谢你的回答 不过整个实验室只有我在弄细胞, 所以INCUBATOR 12/21 23:21
7F：→ m9812:这几天都是空的,囧...之前冻的细胞 老板是说都ok 我解冻完 12/21 23:21
8F：→ m9812:也没异常, 不过只要SUBCULTURE就污染PBS, MEDIUM都CHECK过了 12/21 23:22
9F：→ m9812:不是很想怀疑TRYPSIN...以及我的操作手法, 但是75T MEDIUM漏 12/21 23:23
10F：→ m9812:光, 我看要请李组长出来看看了 囧RZ 12/21 23:24
11F：推 datro:75T是哪一间的？ 拿的时候瓶口稍微朝上 12/21 23:47
12F：→ datro:然後 INCUBATOR 铁盘要清 水盘要用灭菌水更新 不然还是会挂 12/21 23:48
13F：推 oplz:就改用 dish 养就好了 12/22 04:50
14F：推 aceliang:是漏到流出来还是蒸散？incubator温度跟CO2浓度正确？ 12/22 09:23
15F：→ NKTcell:只有你在养细胞? 实验室只有你一个人? 12/23 17:36
16F：推 damyr:你继代培养时有没有为了把细胞打散而敲T75? 12/23 21:29
17F：→ damyr:以前实验室用敲击的方式把细胞敲散继代培养，学姊都没问题 12/23 21:30
18F：→ damyr:结果我一去就敲裂好几个，T75还蛮不耐撞的 12/23 21:31