作者s73121 (ok)
看板Biotech
標題Re: [求救] 關於Ubiquitin的實驗
時間Tue Dec 14 08:52:02 2010
※ 引述《ayutu7673 (一層)》之銘言：
: 不好意思，想請問一下有人有做過ubiquitin的Western blot嗎?
: 我的實驗是將target protein Immunoprecipitate下來，然後再去blot ubiquitin
: (endogenous IP,非overexpression system)
: 想請教一下要如何才能壓出像paper那樣的ubiquitin smear，
: 在實驗步驟上是不是有要特別注意的地方呢?
: 感恩
小弟最近也準備做此實驗
看一些文獻有些會overexpress ubiquitin
但有些則是直接測endogenous ubiquitin
這有差別嗎?在甚麼情況下須要用
overexpress ubiquitin的方式來做in vivo ubiquitination
有相關文獻探討嗎?感謝
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 163.25.87.84
1F：推 ayutu7673:我想有overexpression ubiquitin 壓tag會比較好壓 12/14 11:38
2F：→ ayutu7673:eg: HA-Ub,Flag-Ub 12/14 11:39
3F：推 williamyang:若是要做Ubiquitin的IP,有帶tag也比較方便(如his6) 12/14 15:31