作者s73121 (ok)
看板Biotech
标题Re: [求救] 关於Ubiquitin的实验
时间Tue Dec 14 08:52:02 2010
※ 引述《ayutu7673 (一层)》之铭言：
: 不好意思，想请问一下有人有做过ubiquitin的Western blot吗?
: 我的实验是将target protein Immunoprecipitate下来，然後再去blot ubiquitin
: (endogenous IP,非overexpression system)
: 想请教一下要如何才能压出像paper那样的ubiquitin smear，
: 在实验步骤上是不是有要特别注意的地方呢?
: 感恩
小弟最近也准备做此实验
看一些文献有些会overexpress ubiquitin
但有些则是直接测endogenous ubiquitin
这有差别吗?在甚麽情况下须要用
overexpress ubiquitin的方式来做in vivo ubiquitination
有相关文献探讨吗?感谢
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 163.25.87.84
1F：推 ayutu7673:我想有overexpression ubiquitin 压tag会比较好压 12/14 11:38
2F：→ ayutu7673:eg: HA-Ub,Flag-Ub 12/14 11:39
3F：推 williamyang:若是要做Ubiquitin的IP,有带tag也比较方便(如his6) 12/14 15:31