作者SETboy (三立男孩~~)
看板Biotech
標題[求救] 用ficoll分層無法離下紅血球
時間Sun Dec 12 23:48:21 2010
不好意思，有個問題請教大家
我在取小鼠脾臟的淋巴細胞
取出脾臟後以500rpm離心1 min
再取上清液緩緩加入ficoll中
我在加入ficoll時為了讓分層能更明顯
所以把15 ml離心管傾斜讓加入之液體流速可以更加緩慢
結果離完後(720 RCF,30 min)有部分紅血球附在應該是buffy coat所在位置的管壁上??
紅血球不是比較重嗎?
怎麼會附在分層附近的管壁上?
那如果事情已經發生了
可以取出來重新加入ficoll再離一次嗎?
謝謝~~~
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.120.104.56
1F：推 bigrat:離心轉子是定角的嗎? 要不要試試搖臂式的 12/13 01:44
2F：→ bigrat:Ficoll很難做第二次，濃度不準，sample就混了 12/13 01:47
3F：推 mayjasty:可先確認ficoll 是否過期或者汙損 如果都沒有就先把離心 12/14 13:01
4F：→ mayjasty:後的先破gradient 之後再重新加入一次ficoll 但不建議 12/14 13:03
5F：推 schmitt:那些我猜會不會只是被血紅素染色的WBC 12/15 22:58