作者SETboy (三立男孩~~)
看板Biotech
标题[求救] 用ficoll分层无法离下红血球
时间Sun Dec 12 23:48:21 2010
不好意思，有个问题请教大家
我在取小鼠脾脏的淋巴细胞
取出脾脏後以500rpm离心1 min
再取上清液缓缓加入ficoll中
我在加入ficoll时为了让分层能更明显
所以把15 ml离心管倾斜让加入之液体流速可以更加缓慢
结果离完後(720 RCF,30 min)有部分红血球附在应该是buffy coat所在位置的管壁上??
红血球不是比较重吗?
怎麽会附在分层附近的管壁上?
那如果事情已经发生了
可以取出来重新加入ficoll再离一次吗?
谢谢~~~
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◆ From: 140.120.104.56
1F：推 bigrat:离心转子是定角的吗? 要不要试试摇臂式的 12/13 01:44
2F：→ bigrat:Ficoll很难做第二次，浓度不准，sample就混了 12/13 01:47
3F：推 mayjasty:可先确认ficoll 是否过期或者污损 如果都没有就先把离心 12/14 13:01
4F：→ mayjasty:後的先破gradient 之後再重新加入一次ficoll 但不建议 12/14 13:03
5F：推 schmitt:那些我猜会不会只是被血红素染色的WBC 12/15 22:58