作者pelterl13 (memorize)
看板Biotech
標題[求救] protein 使用FPLC純化的問題
時間Mon Dec 6 17:09:17 2010
各位版上的前輩們好
我想詢問一下 在使用FPLC純化的學長姐或是同學們
我們實驗室純化protein是使用FPLC並且觀察elution在UV 280nm的吸收度
來選擇我們要收的樣品區域
但是剛好最近我在做的protein並不具有太多280吸收的那些residue最重要的就是W一個
都沒有
所以想詢問是否有哪位前輩知道類似的問題是不是有怎麼樣的建議呢？
不然FPLC流出來的elution收了好幾管 也不可能每次都跑個一堆SDS-Page鑑定....
更不用說改純化條件了...
以上是我的問題 希望有經驗的人可以給我一點建議 謝謝
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.114.44.48
1F：→ trumpet:試試全波長掃描看你的protein在哪個波長可以被吸收 12/06 17:30
2F：→ pelterl13:可是...我沒有純的protein 12/06 18:29
3F：推 abcam:resin 的使用正確嗎? 12/06 20:59
4F：推 toocool5941:收集fraction後再去測其他波長，210nm可測胜肽鍵 12/07 11:05
5F：推 alaric:方法不會只有一種. 除了測OD. 也可以測蛋白濃度. or 活性. 12/09 17:21
6F：→ alaric:你總要跑跑SDS-PAGE. 如果你有抗體, 那做個immonoblot test 12/09 17:22