作者pelterl13 (memorize)
看板Biotech
标题[求救] protein 使用FPLC纯化的问题
时间Mon Dec 6 17:09:17 2010
各位版上的前辈们好
我想询问一下 在使用FPLC纯化的学长姐或是同学们
我们实验室纯化protein是使用FPLC并且观察elution在UV 280nm的吸收度
来选择我们要收的样品区域
但是刚好最近我在做的protein并不具有太多280吸收的那些residue最重要的就是W一个
都没有
所以想询问是否有哪位前辈知道类似的问题是不是有怎麽样的建议呢？
不然FPLC流出来的elution收了好几管 也不可能每次都跑个一堆SDS-Page监定....
更不用说改纯化条件了...
以上是我的问题 希望有经验的人可以给我一点建议 谢谢
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.114.44.48
1F：→ trumpet:试试全波长扫描看你的protein在哪个波长可以被吸收 12/06 17:30
2F：→ pelterl13:可是...我没有纯的protein 12/06 18:29
3F：推 abcam:resin 的使用正确吗? 12/06 20:59
4F：推 toocool5941:收集fraction後再去测其他波长，210nm可测胜肽键 12/07 11:05
5F：推 alaric:方法不会只有一种. 除了测OD. 也可以测蛋白浓度. or 活性. 12/09 17:21
6F：→ alaric:你总要跑跑SDS-PAGE. 如果你有抗体, 那做个immonoblot test 12/09 17:22