作者elselita (the masquerade)
看板Biotech
標題[求救] 用blasticidin篩不出stable clone...
時間Tue Nov 30 10:54:44 2010
最近用blasticidin篩stable clone的時候遇到問題，
首先用含有bsd resistance gene的virus infect兩株oral squamous cell carcinoma-
SCC15和OC3 cells，經過兩天後做selection，
OC3很正常的在加了2ug/ml藥後，沒加virus的control組死亡，
但SCC15卻在加到250ug/ml後control都沒有反應，而查到的文獻說5ug/ml即可篩出...
想請問有經驗的板友們，到底這樣可能的問題是出在哪啊?
藥應該是沒問題，因為同一批一起做的，後來也有用新的stock試過...
感謝各位的幫忙!!
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◆ From: 140.116.60.66
1F：推 liuse:你的文獻資料裡面是用同樣的細胞嘛？ 11/30 10:55
謝謝你，不過是同樣的細胞耶
2F：→ liuse:自己先用不同濃度的drug來test一次看看 找出適合的濃度 11/30 10:56
3F：→ liuse:並大概知道放幾天會死光光 11/30 10:56
後來也做了不同濃度的測試，用到1mg/ml細胞看似死亡但只皺縮沒有飄起來，
和以往細胞死亡的情況不同...也很難挑clone~
4F：推 aceliang:會不會你的細胞本來就抗bsd? 11/30 12:40
我也考慮過這件事，不過第一是別的文獻用SCC15是可以篩的，第二是我們的細胞沒有做其
他modify，應該是不會有有抗性的情形出現，所以我也想不到有什麼會產生抗性的可能，
或者我再查查有什麼機制aberration後會bypass bsd作用... 謝謝你^^
※ 編輯: elselita 來自: 140.116.60.66 (11/30 14:16)