作者elselita (the masquerade)
看板Biotech
标题[求救] 用blasticidin筛不出stable clone...
时间Tue Nov 30 10:54:44 2010
最近用blasticidin筛stable clone的时候遇到问题，
首先用含有bsd resistance gene的virus infect两株oral squamous cell carcinoma-
SCC15和OC3 cells，经过两天後做selection，
OC3很正常的在加了2ug/ml药後，没加virus的control组死亡，
但SCC15却在加到250ug/ml後control都没有反应，而查到的文献说5ug/ml即可筛出...
想请问有经验的板友们，到底这样可能的问题是出在哪啊?
药应该是没问题，因为同一批一起做的，後来也有用新的stock试过...
感谢各位的帮忙!!
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.116.60.66
1F：推 liuse:你的文献资料里面是用同样的细胞嘛？ 11/30 10:55
谢谢你，不过是同样的细胞耶
2F：→ liuse:自己先用不同浓度的drug来test一次看看 找出适合的浓度 11/30 10:56
3F：→ liuse:并大概知道放几天会死光光 11/30 10:56
後来也做了不同浓度的测试，用到1mg/ml细胞看似死亡但只皱缩没有飘起来，
和以往细胞死亡的情况不同...也很难挑clone~
4F：推 aceliang:会不会你的细胞本来就抗bsd? 11/30 12:40
我也考虑过这件事，不过第一是别的文献用SCC15是可以筛的，第二是我们的细胞没有做其
他modify，应该是不会有有抗性的情形出现，所以我也想不到有什麽会产生抗性的可能，
或者我再查查有什麽机制aberration後会bypass bsd作用... 谢谢你^^
※ 编辑: elselita 来自: 140.116.60.66 (11/30 14:16)