作者CHOW (WoWer)
看板Biotech
標題[討論] SDS-PAGE running buffer調pH?
時間Thu Nov 18 11:08:11 2010
許多protocol跟各大廠說明書
都建議配置10X running buffer時不要調整pH
想請問各位家裡的會不會調整?
因為我之前跑2D是使用沒調整的來跑 解析度還不賴
而剛剛學妹配置的10X stock有使用HCl調整pH
很擔心會影響我2D-PAGE的解析度阿 T_T
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◆ From: 140.116.25.228
1F：推 yaliu:我沒有調...之前有助教說調pH你跑得時候就知道後果了 11/18 12:27
2F：→ yaliu:但我沒嘗試過就是了.... 11/18 12:27
3F：推 celestial318:我們之前配都沒調 沒出過什麼問題... 11/18 16:29
4F：→ CHOW:嗯我之前也都不調整的 但現在這個Lab某個人堅持要調整XD 11/18 16:58
5F：推 mesenchymal:我想請問這"某個人"堅持的理由跟根據為何?? 11/18 18:19
6F：→ CHOW:他說之前都有調pH 所以以後也都該follow 讓我傻眼 11/18 18:36
7F：→ genep:可以泡兩批一個調一個不調pH, 稀釋成1倍後再測測看pH值. 11/18 21:31
8F：→ genep:我的經驗是說不要調的buffer, 稀釋後pH值才是對的. 11/18 21:32
9F：推 bluecsky:這種buffer pH值你調了就知道 變1X後雖然還是準的 11/19 00:14
10F：→ bluecsky:但是buffer能力會低下很多 長時間跑下去會更加明顯 11/19 00:14
11F：→ bluecsky:為什麼我知道呢 因為之前lab有天兵真的去調過 11/19 00:14
12F：→ bluecsky:結果好一陣子大家PAGE跑起來都超醜的 11/19 00:15
13F：→ bluecsky:同理 DNA電泳buffer也是一樣 因為這個我也被學長唬過orz 11/19 00:16
14F：→ CHOW:謝謝大家提供的經驗 我想我直接找老闆談談好了 囧 11/19 10:09
15F：推 sunnyforever:case by case 每間lab實驗condition不同 11/19 12:25
16F：→ sunnyforever:說不定你那間lab sample剛好就適用調完pH的buffer 11/19 12:26
17F：→ sunnyforever:本來很穩定建立好的system 本就不應該隨意更動 11/19 12:28
18F：→ sunnyforever:若是要test 應該就像genep大講的一樣 兩批做個測試 11/19 12:29