作者CHOW (WoWer)
看板Biotech
标题[讨论] SDS-PAGE running buffer调pH?
时间Thu Nov 18 11:08:11 2010
许多protocol跟各大厂说明书
都建议配置10X running buffer时不要调整pH
想请问各位家里的会不会调整?
因为我之前跑2D是使用没调整的来跑 解析度还不赖
而刚刚学妹配置的10X stock有使用HCl调整pH
很担心会影响我2D-PAGE的解析度阿 T_T
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.116.25.228
1F:推 yaliu:我没有调...之前有助教说调pH你跑得时候就知道後果了 11/18 12:27
2F:→ yaliu:但我没尝试过就是了.... 11/18 12:27
3F:推 celestial318:我们之前配都没调 没出过什麽问题... 11/18 16:29
4F:→ CHOW:嗯我之前也都不调整的 但现在这个Lab某个人坚持要调整XD 11/18 16:58
5F:推 mesenchymal:我想请问这"某个人"坚持的理由跟根据为何?? 11/18 18:19
6F:→ CHOW:他说之前都有调pH 所以以後也都该follow 让我傻眼 11/18 18:36
7F:→ genep:可以泡两批一个调一个不调pH, 稀释成1倍後再测测看pH值. 11/18 21:31
8F:→ genep:我的经验是说不要调的buffer, 稀释後pH值才是对的. 11/18 21:32
9F:推 bluecsky:这种buffer pH值你调了就知道 变1X後虽然还是准的 11/19 00:14
10F:→ bluecsky:但是buffer能力会低下很多 长时间跑下去会更加明显 11/19 00:14
11F:→ bluecsky:为什麽我知道呢 因为之前lab有天兵真的去调过 11/19 00:14
12F:→ bluecsky:结果好一阵子大家PAGE跑起来都超丑的 11/19 00:15
13F:→ bluecsky:同理 DNA电泳buffer也是一样 因为这个我也被学长唬过orz 11/19 00:16
14F:→ CHOW:谢谢大家提供的经验 我想我直接找老板谈谈好了 囧 11/19 10:09
15F:推 sunnyforever:case by case 每间lab实验condition不同 11/19 12:25
16F:→ sunnyforever:说不定你那间lab sample刚好就适用调完pH的buffer 11/19 12:26
17F:→ sunnyforever:本来很稳定建立好的system 本就不应该随意更动 11/19 12:28
18F:→ sunnyforever:若是要test 应该就像genep大讲的一样 两批做个测试 11/19 12:29