作者dormeur (科科 XX人生)
看板Biotech
標題[求救] 冷凍包埋一問
時間Tue Nov 16 12:34:54 2010
就我所知
冷凍包埋比較適合拿來作IHC 因此組織多半直接以OCT包埋後切片
而福馬林固定後以parafin包埋的組織較適合拿來觀察型態
我現在有個問題
因目前可使用的冷凍切片機最低溫只能到-20
而我組織屬於脂肪較多的組織
在這溫度切出來的片子 一些該有的型態排列有點類似受到擠壓的感覺
與其他人討論後 決定嘗試固定後冷凍包埋的方式切看看 參考咕狗後的結果
我從-80冰箱取frozen的組織以paraformaldehyde固定 o/n後
直接以OCT包埋
但切片結果發現 固定後的組織很容易切碎
不知有何更好得方法？
就我目前想到的解決方法
一些組織可用parafin固定 切片後用來觀察型態
但一些染色方式仍逃不掉要用冷凍切片才能染
請問
組織固定後冷凍包埋是否有其必要性？
又我的固定方式是否恰當？
謝謝
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.112.122.25
1F：推 hsin1106:碎裂可能是脫水不完全造成 書上建議的固定液跟組織體積比 11/16 23:57
2F：→ hsin1106:是10比一 另外就是組織冰在-80度 水的結晶可能會造成組織 11/17 00:11
3F：→ hsin1106:結構上的破壞 冷凍切片的優點就是可避免固定過程中抗原受 11/17 00:15
4F：→ hsin1106:影響而無法染色 但是否會受影響就要看您自身的實驗結果了 11/17 00:17