作者dormeur (科科 XX人生)
看板Biotech
标题[求救] 冷冻包埋一问
时间Tue Nov 16 12:34:54 2010
就我所知
冷冻包埋比较适合拿来作IHC 因此组织多半直接以OCT包埋後切片
而福马林固定後以parafin包埋的组织较适合拿来观察型态
我现在有个问题
因目前可使用的冷冻切片机最低温只能到-20
而我组织属於脂肪较多的组织
在这温度切出来的片子 一些该有的型态排列有点类似受到挤压的感觉
与其他人讨论後 决定尝试固定後冷冻包埋的方式切看看 参考咕狗後的结果
我从-80冰箱取frozen的组织以paraformaldehyde固定 o/n後
直接以OCT包埋
但切片结果发现 固定後的组织很容易切碎
不知有何更好得方法？
就我目前想到的解决方法
一些组织可用parafin固定 切片後用来观察型态
但一些染色方式仍逃不掉要用冷冻切片才能染
请问
组织固定後冷冻包埋是否有其必要性？
又我的固定方式是否恰当？
谢谢
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.112.122.25
1F：推 hsin1106:碎裂可能是脱水不完全造成 书上建议的固定液跟组织体积比 11/16 23:57
2F：→ hsin1106:是10比一 另外就是组织冰在-80度 水的结晶可能会造成组织 11/17 00:11
3F：→ hsin1106:结构上的破坏 冷冻切片的优点就是可避免固定过程中抗原受 11/17 00:15
4F：→ hsin1106:影响而无法染色 但是否会受影响就要看您自身的实验结果了 11/17 00:17