作者eatofy (平常心)
看板Biotech
標題[討論] western blot menbrane裁切
時間Sat Oct 30 20:51:23 2010
我真的覺得 手殘 ==
在裁menbrane時常歪掉
我們是用濕轉至的 因為我技術不是很好
再放gel或membrane時,不太正
或者是在趕氣泡時 會有點歪掉
導致 在transfer結束後 在裁menbrame時很容易手殘
(見算沒歪掉 也有手殘的紀錄@@)
想請問大家 在裁切membrane上有什麼技巧嗎
我是直接在marker上畫線 用尺下去平行 裁切
至於為什麼要裁切
因為要看兩個蛋白 加上internal control共三個
所以不太想用stripping
我看的事板分子量是70 跟36 在actine上的裁切就很尷尬
在marker 50跟35之間一歪掉就糗了
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 120.126.71.89
1F:推 kcc0606:transfer後 請在membrane上描畫出膠的上下左右邊界 10/30 21:08
2F:→ kcc0606:以膠的邊界為準平移 並對準marker 做裁切,或換個有40多 10/30 21:12
3F:→ kcc0606:KD的marker來對了 10/30 21:12
4F:推 ballycotton7:如果well數夠的話 會在sample的兩邊都load marker 10/30 21:39
5F:→ ballycotton7:切的時候就拿直尺對兩邊marker切就萬事ok 10/30 21:40
6F:推 gryou:染 ponceau s 在切,比較不會歪! 10/30 21:52
7F:→ mattmatt:買個裁紙器..... 10/30 22:44
8F:推 yitingg:染 ponceau s+1 染好再剪 絕對不會歪掉 10/30 23:19
9F:推 celestial318:就marker要load 盡量跑開XD 10/30 23:56
10F:→ eatofy:PONCEAUS S沒有染過耶 可是這樣對一抗 不會有影?想 10/31 00:46
11F:推 wuzer:我會寧願跑開一點哩...不過ponceau s以前染過,看起來沒影響 10/31 01:07
12F:→ jsi:sample兩邊load marker,membrane放袋中,直尺對齊兩邊marker 10/31 03:06
13F:→ jsi:在塑膠袋上畫線,用剪刀沿著線剪,不會歪...很直 10/31 03:07
14F:推 hilarity:ponceau s不會有影響啊 用wash buffer洗到紅色退掉就好了 10/31 10:24
15F:→ hilarity:順便還可以看你transfer的效果怎麼樣 10/31 10:25
16F:→ scorpiuswu:推mattmatt大,用裁紙器,而且要用滾輪刀的,不要鍘刀的 11/08 14:58