作者eatofy (平常心)
看板Biotech
标题[讨论] western blot menbrane裁切
时间Sat Oct 30 20:51:23 2010
我真的觉得 手残 ==
在裁menbrane时常歪掉
我们是用湿转至的 因为我技术不是很好
再放gel或membrane时,不太正
或者是在赶气泡时 会有点歪掉
导致 在transfer结束後 在裁menbrame时很容易手残
(见算没歪掉 也有手残的纪录@@)
想请问大家 在裁切membrane上有什麽技巧吗
我是直接在marker上画线 用尺下去平行 裁切
至於为什麽要裁切
因为要看两个蛋白 加上internal control共三个
所以不太想用stripping
我看的事板分子量是70 跟36 在actine上的裁切就很尴尬
在marker 50跟35之间一歪掉就糗了
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 120.126.71.89
1F:推 kcc0606:transfer後 请在membrane上描画出胶的上下左右边界 10/30 21:08
2F:→ kcc0606:以胶的边界为准平移 并对准marker 做裁切,或换个有40多 10/30 21:12
3F:→ kcc0606:KD的marker来对了 10/30 21:12
4F:推 ballycotton7:如果well数够的话 会在sample的两边都load marker 10/30 21:39
5F:→ ballycotton7:切的时候就拿直尺对两边marker切就万事ok 10/30 21:40
6F:推 gryou:染 ponceau s 在切,比较不会歪! 10/30 21:52
7F:→ mattmatt:买个裁纸器..... 10/30 22:44
8F:推 yitingg:染 ponceau s+1 染好再剪 绝对不会歪掉 10/30 23:19
9F:推 celestial318:就marker要load 尽量跑开XD 10/30 23:56
10F:→ eatofy:PONCEAUS S没有染过耶 可是这样对一抗 不会有影?想 10/31 00:46
11F:推 wuzer:我会宁愿跑开一点哩...不过ponceau s以前染过,看起来没影响 10/31 01:07
12F:→ jsi:sample两边load marker,membrane放袋中,直尺对齐两边marker 10/31 03:06
13F:→ jsi:在塑胶袋上画线,用剪刀沿着线剪,不会歪...很直 10/31 03:07
14F:推 hilarity:ponceau s不会有影响啊 用wash buffer洗到红色退掉就好了 10/31 10:24
15F:→ hilarity:顺便还可以看你transfer的效果怎麽样 10/31 10:25
16F:→ scorpiuswu:推mattmatt大,用裁纸器,而且要用滚轮刀的,不要铡刀的 11/08 14:58