作者roger3112 (我想休息...)
看板Biotech
標題[求救] 用PCR clone promoter
時間Sat Oct 30 13:47:04 2010
小弟我最近要用PCR將一段genomic DNA中一段promoter clone出來
但是之前試了很多condition都沒有辦法(溫度，濃度)，
想要請教板上有沒有高手做過這種實驗，可以跟我說一下大概要注意什麼嗎?
我想要clone出來的長度大概是2Kb左右
感謝!!!
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 120.126.78.234
1F：推 kaifish:請搜尋一下high GC content PCR的相關文獻 10/30 14:17
2F：→ kaifish:裡面常出現的方法都值得您參考 10/30 14:17
3F：→ chaunen:1% DMSO, annealing 溫度用Tm -2 -0 +2去抓看看 10/30 14:59
4F：→ chaunen:template 濃度 1~2ng genomic DNA /ul 假設PCR體積25ul 10/30 15:04
5F：→ chaunen:放個50ng以下的genomic DNA 10/30 15:04