作者roger3112 (我想休息...)
看板Biotech
标题[求救] 用PCR clone promoter
时间Sat Oct 30 13:47:04 2010
小弟我最近要用PCR将一段genomic DNA中一段promoter clone出来
但是之前试了很多condition都没有办法(温度，浓度)，
想要请教板上有没有高手做过这种实验，可以跟我说一下大概要注意什麽吗?
我想要clone出来的长度大概是2Kb左右
感谢!!!
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 120.126.78.234
1F：推 kaifish:请搜寻一下high GC content PCR的相关文献 10/30 14:17
2F：→ kaifish:里面常出现的方法都值得您参考 10/30 14:17
3F：→ chaunen:1% DMSO, annealing 温度用Tm -2 -0 +2去抓看看 10/30 14:59
4F：→ chaunen:template 浓度 1~2ng genomic DNA /ul 假设PCR体积25ul 10/30 15:04
5F：→ chaunen:放个50ng以下的genomic DNA 10/30 15:04