作者Feting ( ><>J <>< し<><)
看板Biotech
標題[求救] ficoll 400的配法
時間Thu Oct 28 18:57:33 2010
最近實驗上要用到蠻純的白血球,而且時間上非常緊迫...
但血液使用RBC lysis buffer和PBS洗了幾次仍然有不少的紅血球碎片混在一起
所以訂了sigma 的 ficoll 400
想試試看能不能分離出比較純的buffy coat
查了一些文獻似乎都是配成密度1.077左右的Ficoll-paque使用
(Ficoll-paque應該是用ficoll 400 粉末配的吧?)
ficoll-paque的配方裡說到每100ml水溶液內含:
5.7gm ficoll 400、9gm sodium diatrizoate with calcium EDTA
所以應該是用純水配製的?
另外sodium diatrizoate with calccium EDTA中的"with calccium EDTA"是甚麼意思
如果配出的ficoll中沒有加sodium diatrizoate的話還能用嗎...?
還是ficoll 400 另有配法?
最後,其實這應該是最根本的問題,用了ficoll之後對於隔離紅血球的效果是否很有效?
效果是否會比本文一開始所用的方法好?
或是想要比較徹底的清除紅血球的碎片是不是有甚麼有效的方法@@?
謝謝
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※ 編輯: Feting 來自: 140.114.108.85 (10/28 18:59)
1F:推 crement:為什麼不買現成的?! Invitrogen有阿 10/28 22:28
2F:→ crement:一定要有sodium diatrizoate 這是調比重用的 10/28 22:29
3F:→ Feting:那麼"with calccium EDTA"是指?一般買的sodium diatrizoate 10/28 22:37
4F:→ Feting:還要另外加嗎? 10/28 22:37
5F:→ Feting:因為買之前真的弄不清楚那麼多種種類有甚麼差別 ... 10/28 22:39
6F:推 Cmetallifer:買現成的比較好吧~ GE也有呀~ 自己配買那些都多少錢了 11/01 22:14