作者Feting ( ><>J <>< し<><)
看板Biotech
标题[求救] ficoll 400的配法
时间Thu Oct 28 18:57:33 2010
最近实验上要用到蛮纯的白血球，而且时间上非常紧迫...
但血液使用RBC lysis buffer和PBS洗了几次仍然有不少的红血球碎片混在一起
所以订了sigma 的 ficoll 400
想试试看能不能分离出比较纯的buffy coat
查了一些文献似乎都是配成密度1.077左右的Ficoll-paque使用
(Ficoll-paque应该是用ficoll 400 粉末配的吧？)
ficoll-paque的配方里说到每100ml水溶液内含:
5.7gm ficoll 400、9gm sodium diatrizoate with calcium EDTA
所以应该是用纯水配制的?
另外sodium diatrizoate with calccium EDTA中的"with calccium EDTA"是甚麽意思
如果配出的ficoll中没有加sodium diatrizoate的话还能用吗...?
还是ficoll 400 另有配法?
最後，其实这应该是最根本的问题，用了ficoll之後对於隔离红血球的效果是否很有效?
效果是否会比本文一开始所用的方法好?
或是想要比较彻底的清除红血球的碎片是不是有甚麽有效的方法@@?
谢谢
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◆ From: 140.114.108.85
※ 编辑: Feting 来自: 140.114.108.85 (10/28 18:59)
1F：推 crement:为什麽不买现成的?! Invitrogen有阿 10/28 22:28
2F：→ crement:一定要有sodium diatrizoate 这是调比重用的 10/28 22:29
3F：→ Feting:那麽"with calccium EDTA"是指?一般买的sodium diatrizoate 10/28 22:37
4F：→ Feting:还要另外加吗? 10/28 22:37
5F：→ Feting:因为买之前真的弄不清楚那麽多种种类有甚麽差别 ... 10/28 22:39
6F：推 Cmetallifer:买现成的比较好吧~ GE也有呀~ 自己配买那些都多少钱了 11/01 22:14