作者kcc0606 (ccc)
看板Biotech
標題[討論] Western Blot電泳所遭遇到的問題
時間Tue Oct 26 14:29:02 2010
最近幾次跑完電泳 準備作transfer時
發現下層膠下面1/3的地方產生波浪狀的鄒折
marker 55kd 以下都跑到歪 且無法辨識
最近一次更誇張準備 TRANSFER時 尚未拆開玻璃取出膠
膠就在片玻璃間就產生明顯的皺折 難怪當時覺得SAMPLE無法繼續往下跑
請問這可能是哪裡發生問題?
有聽說過換掉電泳設備裡的金屬絲 便能解決此事
不知道是否有其他建議 謝謝
----------------------------------已解決------------------------------
後來將泡上下層膠的tris-hcl 全部重泡 就沒再發生這個問題了
提供給大家參考 謝謝
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 203.64.247.100
1F：推 CErline:檢查一下鑄膠時有沒有漏 10/26 16:16
2F：推 begrace:acrylamide裡面是否有雜質? 10/26 17:01
3F：→ kcc0606:鑄膠是沒有問題的 凝結後對過標記位置 沒有漏 10/26 21:09
4F：→ kcc0606:請問為何會認為是acrylamide的問題呢? 10/26 21:14
5F：推 silverberry:有些品質較差的acrylamide裡面會有懸浮物，以前 10/27 15:19
6F：→ silverberry:實驗室會過.22 filter 確保裡面沒有particle 10/27 15:19
7F：→ silverberry:也有可能是凝膠凝得太快，裡面polymerization不均勻 10/27 15:20
8F：推 tsubasawolfy:overheat? 10/27 16:31
9F：→ kcc0606:acrylamide是Bio-Rad 品質應該OK 不過我會再注意 10/27 19:45
10F：→ kcc0606:沒有過熱 電泳怕過熱出現smile效應 電泳槽都是浸在冰內 10/27 19:48
11F：→ kcc0606:電泳結束後都有確認裡面的溫度 10/27 19:48
※ 編輯: kcc0606 來自: 123.204.17.158 (11/11 21:40)