作者kcc0606 (ccc)
看板Biotech
标题[讨论] Western Blot电泳所遭遇到的问题
时间Tue Oct 26 14:29:02 2010
最近几次跑完电泳 准备作transfer时
发现下层胶下面1/3的地方产生波浪状的邹折
marker 55kd 以下都跑到歪 且无法辨识
最近一次更夸张准备 TRANSFER时 尚未拆开玻璃取出胶
胶就在片玻璃间就产生明显的皱折 难怪当时觉得SAMPLE无法继续往下跑
请问这可能是哪里发生问题?
有听说过换掉电泳设备里的金属丝 便能解决此事
不知道是否有其他建议 谢谢
----------------------------------已解决------------------------------
後来将泡上下层胶的tris-hcl 全部重泡 就没再发生这个问题了
提供给大家参考 谢谢
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 203.64.247.100
1F：推 CErline:检查一下铸胶时有没有漏 10/26 16:16
2F：推 begrace:acrylamide里面是否有杂质? 10/26 17:01
3F：→ kcc0606:铸胶是没有问题的 凝结後对过标记位置 没有漏 10/26 21:09
4F：→ kcc0606:请问为何会认为是acrylamide的问题呢? 10/26 21:14
5F：推 silverberry:有些品质较差的acrylamide里面会有悬浮物，以前 10/27 15:19
6F：→ silverberry:实验室会过.22 filter 确保里面没有particle 10/27 15:19
7F：→ silverberry:也有可能是凝胶凝得太快，里面polymerization不均匀 10/27 15:20
8F：推 tsubasawolfy:overheat? 10/27 16:31
9F：→ kcc0606:acrylamide是Bio-Rad 品质应该OK 不过我会再注意 10/27 19:45
10F：→ kcc0606:没有过热 电泳怕过热出现smile效应 电泳槽都是浸在冰内 10/27 19:48
11F：→ kcc0606:电泳结束後都有确认里面的温度 10/27 19:48
※ 编辑: kcc0606 来自: 123.204.17.158 (11/11 21:40)