作者LINGO1115 (蘋果尾魚)
看板Biotech
標題[求救] 定序出現問題
時間Wed Oct 20 22:03:52 2010
想請問一下
我用PCR批出一段基因序列(約1500bp)
送去生技公司定序後發現
Forward primer在讀到約200bp時,開始出現雙重peak
不過我再送定序前有做gel extration
造理說應該不會有雜bend才對呀!!
就算有雜bend,應該也在一開始定序就要有雙重peak
生技公司給我的建議是重新訂購primer...
不過我很疑惑為什麼在定序到一半時會有雙重peak啊~~
有人有這樣的經驗嗎??
後來是如何解決的呢?
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 122.116.13.191
1F：推 kaifish:檢查一下是不是有重複序列造成的frameshift 10/21 00:11
2F：推 MrCAKE:有切單一band並不代表產物就是純的 10/21 00:16
3F：推 Cmetallifer:切膠後還有這情形 就要做Cloning了唷 ㄎㄎ 11/25 00:25