作者LINGO1115 (苹果尾鱼)
看板Biotech
标题[求救] 定序出现问题
时间Wed Oct 20 22:03:52 2010
想请问一下
我用PCR批出一段基因序列(约1500bp)
送去生技公司定序後发现
Forward primer在读到约200bp时,开始出现双重peak
不过我再送定序前有做gel extration
造理说应该不会有杂bend才对呀!!
就算有杂bend,应该也在一开始定序就要有双重peak
生技公司给我的建议是重新订购primer...
不过我很疑惑为什麽在定序到一半时会有双重peak啊~~
有人有这样的经验吗??
後来是如何解决的呢?
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◆ From: 122.116.13.191
1F：推 kaifish:检查一下是不是有重复序列造成的frameshift 10/21 00:11
2F：推 MrCAKE:有切单一band并不代表产物就是纯的 10/21 00:16
3F：推 Cmetallifer:切胶後还有这情形 就要做Cloning了唷 ㄎㄎ 11/25 00:25