作者englandtea (酒是我最好的腮紅)
看板Biotech
標題[求救] 活化的RAW
時間Tue Oct 19 15:49:51 2010
發問時請注意，若是要問實驗相關的問題，請將實驗的步驟、所用的條件大致列出
以方便板友幫您追蹤問題
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最近在做RAW吞噬能力的實驗
LPS組和 LPS+polymyxin B組還算正常
但medium組一直都很高...大概該LPS刺激的差不多>_<
本來有擔心會不會是Medium有污染
加做了Medium+PMB仍一樣高
爬了文發現RAW有活化的問題 可能我的細胞是活化狀況的RAW
長觸手的細胞應該有個6成吧(聽說要5-10%以下 大部份應該是圓圓的細胞兒)
sorry~當助理才第一次養這株細胞 lab裡又沒學長姐可問 嗚...
有人說細胞量太少-->RAW會活化生出觸手-->放一天長滿一點隔天就以做
細胞量太多-->RAW活化-->分盤seeding少一點,養幾天後再做
可是我試過...都沒用啊>____<
想請問:
1.RAW應該seeding多少量?(per ml)
2.已"活化的RAW"會因為培養個幾天而變回"非活化的RAW"嗎?
os:經濟部的計劃真得是...很夭壽很麻煩!@#$%^...
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 203.71.94.5
1F：推 mingchao:我的經驗 長腳的(活化)不太會再變回圓的~重新解凍新的 10/19 17:16
2F：→ mingchao:seeding 要用刮的或是拍下來 不要用切的~ 10/19 17:19
3F：→ mingchao:我是50-100萬/10ml(10cm dish) 放兩至三天就會八成滿左右 10/19 17:24
4F：推 yitingg:對 活化的不會變回來非活化了 請解凍新的 10/19 18:43
5F：推 liuse:長腳就爆了 以前經驗 10/19 19:09
6F：推 allergy1115:是macrophage就會長出腳, monocyte才是圓圓的 10/19 20:39
7F：→ allergy1115:作吞噬,本來就該是macrophage 才有意義 10/19 20:40
8F：→ englandtea:感謝m大的建議~我會此量seeding看看的! 10/20 13:05
9F：→ englandtea:我不用trypsin切~都是用pbs或medium沖下來的 10/20 13:05
10F：→ englandtea:非常感謝大家的建議~我會乖乖跟別家lab要細胞重新解凍 10/20 13:07