作者englandtea (酒是我最好的腮红)
看板Biotech
标题[求救] 活化的RAW
时间Tue Oct 19 15:49:51 2010
发问时请注意，若是要问实验相关的问题，请将实验的步骤、所用的条件大致列出
以方便板友帮您追踪问题
----请将上列注意事项以 ctrl + k 删除後开始编辑文章----
最近在做RAW吞噬能力的实验
LPS组和 LPS+polymyxin B组还算正常
但medium组一直都很高...大概该LPS刺激的差不多>_<
本来有担心会不会是Medium有污染
加做了Medium+PMB仍一样高
爬了文发现RAW有活化的问题 可能我的细胞是活化状况的RAW
长触手的细胞应该有个6成吧(听说要5-10%以下 大部份应该是圆圆的细胞儿)
sorry~当助理才第一次养这株细胞 lab里又没学长姐可问 呜...
有人说细胞量太少-->RAW会活化生出触手-->放一天长满一点隔天就以做
细胞量太多-->RAW活化-->分盘seeding少一点,养几天後再做
可是我试过...都没用啊>____<
想请问:
1.RAW应该seeding多少量?(per ml)
2.已"活化的RAW"会因为培养个几天而变回"非活化的RAW"吗?
os:经济部的计划真得是...很夭寿很麻烦!@#$%^...
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 203.71.94.5
1F：推 mingchao:我的经验 长脚的(活化)不太会再变回圆的~重新解冻新的 10/19 17:16
2F：→ mingchao:seeding 要用刮的或是拍下来 不要用切的~ 10/19 17:19
3F：→ mingchao:我是50-100万/10ml(10cm dish) 放两至三天就会八成满左右 10/19 17:24
4F：推 yitingg:对 活化的不会变回来非活化了 请解冻新的 10/19 18:43
5F：推 liuse:长脚就爆了 以前经验 10/19 19:09
6F：推 allergy1115:是macrophage就会长出脚, monocyte才是圆圆的 10/19 20:39
7F：→ allergy1115:作吞噬,本来就该是macrophage 才有意义 10/19 20:40
8F：→ englandtea:感谢m大的建议~我会此量seeding看看的! 10/20 13:05
9F：→ englandtea:我不用trypsin切~都是用pbs或medium冲下来的 10/20 13:05
10F：→ englandtea:非常感谢大家的建议~我会乖乖跟别家lab要细胞重新解冻 10/20 13:07