作者xjoyx (joy)
看板Biotech
標題[求救] PCR primer gc% 太低怎麼辦
時間Thu Oct 14 18:56:18 2010
想請問各位大大
如果要設計primer的位置大部分都是at
要如何增加gc%
要p cDNA 從ATG開始 但是設計PRIMER的 GC值 只有34% 如果延長長度
由於後面有更多的AT 所以數值會越來越下降
想請問 要怎麼解決
或者P不出來是因為 這個cDNA是自己抽mRNA 轉的嗎
我的大小大概有2k左右
謝謝!!!
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◆ From: 140.112.52.34
1F：推 Fourfish:那我會只考慮Tm值 GC低還好 GC太高比較難搞 10/14 21:15
2F：→ soom:同上，多做幾個nt到Tm值高一點 10/14 22:38
3F：推 a001ou:那請問一般Tm的考量有哪些呢 可以分享一下嗎 10/15 20:45
4F：推 Fourfish:樓上指Tm值嗎? 一般PCR我習慣抓55-65之間 許多產品目錄都 10/16 15:46
5F：→ Fourfish:有PCR的原理說明 可以參考看看 10/16 15:47