作者xjoyx (joy)
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标题[求救] PCR primer gc% 太低怎麽办
时间Thu Oct 14 18:56:18 2010
想请问各位大大
如果要设计primer的位置大部分都是at
要如何增加gc%
要p cDNA 从ATG开始 但是设计PRIMER的 GC值 只有34% 如果延长长度
由於後面有更多的AT 所以数值会越来越下降
想请问 要怎麽解决
或者P不出来是因为 这个cDNA是自己抽mRNA 转的吗
我的大小大概有2k左右
谢谢!!!
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◆ From: 140.112.52.34
1F：推 Fourfish:那我会只考虑Tm值 GC低还好 GC太高比较难搞 10/14 21:15
2F：→ soom:同上，多做几个nt到Tm值高一点 10/14 22:38
3F：推 a001ou:那请问一般Tm的考量有哪些呢 可以分享一下吗 10/15 20:45
4F：推 Fourfish:楼上指Tm值吗? 一般PCR我习惯抓55-65之间 许多产品目录都 10/16 15:46
5F：→ Fourfish:有PCR的原理说明 可以参考看看 10/16 15:47