作者Feting ( ><>J <>< し<><)
看板Biotech
標題[求救] buffy coat的分離
時間Wed Oct 13 11:27:38 2010
小弟是理工背景實驗室的同學
最近需要使用白血球進行實驗
加了heparin的血液，用3000rpm、4度c、離心15分鐘(沒有使用ficoll)
之後可以看出血液的分層
但是卻不知道要如何將buffy coat從血液中抽出來
其實我也不是很確定我以為是buffy coat的東西到底是不是buffy coat
應該是離心後中間那層很薄的灰白色層吧?
想請問各位前輩有甚麼方法可以將buffy coat給分離出來
另外，buffy coat分離出來是甚麼樣的狀態?
是液體，還是一片膠狀的東西?
因為看到某處的操作說明說buffy coat如果夠堅固的話，可以將整片buffy coat挑起
由於實驗室的學長姐也沒使用過白血球做實驗，對這些實在不清楚
希望各位前輩可以給予指教
謝謝
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◆ From: 140.114.202.176
※ 編輯: Feting 來自: 140.114.202.176 (10/13 11:33)
1F：推 captdavince:buffy coat只是細胞因為離心積成的.. 10/13 11:38
2F：→ captdavince:一般來說都是用滴管先把上面的血漿吸掉.. 10/13 11:39
3F：推 psychehsu:有時sample狀況不一定~常會出現不明顯的buffy coat~ 10/13 15:09
4F：→ psychehsu:就固定依sample比例取多少的中間層,多少都會吸到plasma 10/13 15:12
5F：→ psychehsu:我有用ficoll~會在plasma跟ficoll中會看到薄薄白色層 10/13 15:17
6F：推 kg9101266:我是用3000rpm、4度c、離心20分鐘(沒有使用ficoll) 10/13 16:17
7F：→ kg9101266:把drop直接伸進去吸取中層(多少會吸到一些血漿和紅血球) 10/13 16:18
8F：→ kg9101266:buffy coat的厚薄和易取度因人而異，有的很厚有的很薄 10/13 16:19
9F：→ kg9101266:有的很容易整片就被吸起來 有的卻跟下層黏很緊 需要技巧 10/13 16:20
10F：→ kg9101266:我分出來的buffy coat多少都還是會帶紅血球 所以是 10/13 16:20
11F：→ kg9101266:紅紅的液體 不知道這樣有沒有幫助 PS我在醫院的研究室 10/13 16:21
12F：→ kg9101266:幫忙收集檢體 聽說申請者回去還會用其他方法把紅血球 10/13 16:22
13F：→ kg9101266:溶破 所以當初教我的前輩說儘量不要吸到紅血球 但多少 10/13 16:22
14F：→ kg9101266:有一點還是沒關係 (我非檢體使用者 所以不知buffy coat) 10/13 16:23
15F：→ kg9101266:如果帶一些紅血球 對實驗有無影響 就要請問版上前輩了) 10/13 16:24