作者Feting ( ><>J <>< し<><)
看板Biotech
标题[求救] buffy coat的分离
时间Wed Oct 13 11:27:38 2010
小弟是理工背景实验室的同学
最近需要使用白血球进行实验
加了heparin的血液，用3000rpm、4度c、离心15分钟(没有使用ficoll)
之後可以看出血液的分层
但是却不知道要如何将buffy coat从血液中抽出来
其实我也不是很确定我以为是buffy coat的东西到底是不是buffy coat
应该是离心後中间那层很薄的灰白色层吧?
想请问各位前辈有甚麽方法可以将buffy coat给分离出来
另外，buffy coat分离出来是甚麽样的状态?
是液体，还是一片胶状的东西?
因为看到某处的操作说明说buffy coat如果够坚固的话，可以将整片buffy coat挑起
由於实验室的学长姐也没使用过白血球做实验，对这些实在不清楚
希望各位前辈可以给予指教
谢谢
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◆ From: 140.114.202.176
※ 编辑: Feting 来自: 140.114.202.176 (10/13 11:33)
1F：推 captdavince:buffy coat只是细胞因为离心积成的.. 10/13 11:38
2F：→ captdavince:一般来说都是用滴管先把上面的血浆吸掉.. 10/13 11:39
3F：推 psychehsu:有时sample状况不一定~常会出现不明显的buffy coat~ 10/13 15:09
4F：→ psychehsu:就固定依sample比例取多少的中间层,多少都会吸到plasma 10/13 15:12
5F：→ psychehsu:我有用ficoll~会在plasma跟ficoll中会看到薄薄白色层 10/13 15:17
6F：推 kg9101266:我是用3000rpm、4度c、离心20分钟(没有使用ficoll) 10/13 16:17
7F：→ kg9101266:把drop直接伸进去吸取中层(多少会吸到一些血浆和红血球) 10/13 16:18
8F：→ kg9101266:buffy coat的厚薄和易取度因人而异，有的很厚有的很薄 10/13 16:19
9F：→ kg9101266:有的很容易整片就被吸起来 有的却跟下层黏很紧 需要技巧 10/13 16:20
10F：→ kg9101266:我分出来的buffy coat多少都还是会带红血球 所以是 10/13 16:20
11F：→ kg9101266:红红的液体 不知道这样有没有帮助 PS我在医院的研究室 10/13 16:21
12F：→ kg9101266:帮忙收集检体 听说申请者回去还会用其他方法把红血球 10/13 16:22
13F：→ kg9101266:溶破 所以当初教我的前辈说尽量不要吸到红血球 但多少 10/13 16:22
14F：→ kg9101266:有一点还是没关系 (我非检体使用者 所以不知buffy coat) 10/13 16:23
15F：→ kg9101266:如果带一些红血球 对实验有无影响 就要请问版上前辈了) 10/13 16:24