作者iosteven (iosteven)
看板Biotech
標題[求救] invasion assay
時間Tue Sep 28 02:03:14 2010
最近利用肺癌細胞株CL1-5要加inhibitor看它的變化
要開始作invasion assay的實驗(我有查過kit 但實驗室有matrixgel老師不會答應買的..)
於是去看了一些的文獻以後有一點不甚了解
就是要coating matrix gel的步驟是
利用6 well的chamber來進行
我看到的流程是matrixgel :SF medium = 1:4 -->這常見嗎?
然後注入一定的量以後等它乾--> 要注入多少量才夠又不會太厚?
有的說放進37度的incubator 1hr，還有是要coating以後放到4度C冰箱 overnight
不知道該如何下判斷?
很多paper沒寫得很詳細= =
請大家幫幫我.... 謝謝
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◆ From: 118.171.118.8
1F：→ gryou:我講一下我們實驗是的作法 09/29 13:24
2F：→ gryou:首先 25%的確是常使用的 但因細胞INVASION能力不同 故也可改 09/29 13:25
3F：→ gryou:10% 因為我們家是用24well用的CHAMBER 因此不知道量適不適合 09/29 13:27
4F：→ gryou:100μL/1 chamber/37度西 incubator 6hr 09/29 13:30
5F：→ gryou:well 跟 well 中間加入 DPBS 使其保溼 09/29 13:30
6F：→ gryou:這是要避免他太乾 形成凸面 這樣細胞會分佈到管壁旁邊！ 09/29 13:32
7F：→ gryou:incubate 完後 加入 10^5 cells/200μL/1 chamber 09/29 13:33
8F：→ gryou:然後置入culture media之中 當然這些過程都是要避免氣泡產 09/29 13:34
9F：→ gryou:生的 希望這樣是有幫助到你！ 09/29 13:36