作者iosteven (iosteven)
看板Biotech
标题[求救] invasion assay
时间Tue Sep 28 02:03:14 2010
最近利用肺癌细胞株CL1-5要加inhibitor看它的变化
要开始作invasion assay的实验(我有查过kit 但实验室有matrixgel老师不会答应买的..)
於是去看了一些的文献以後有一点不甚了解
就是要coating matrix gel的步骤是
利用6 well的chamber来进行
我看到的流程是matrixgel :SF medium = 1:4 -->这常见吗?
然後注入一定的量以後等它乾--> 要注入多少量才够又不会太厚?
有的说放进37度的incubator 1hr，还有是要coating以後放到4度C冰箱 overnight
不知道该如何下判断?
很多paper没写得很详细= =
请大家帮帮我.... 谢谢
--
※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 118.171.118.8
1F：→ gryou:我讲一下我们实验是的作法 09/29 13:24
2F：→ gryou:首先 25%的确是常使用的 但因细胞INVASION能力不同 故也可改 09/29 13:25
3F：→ gryou:10% 因为我们家是用24well用的CHAMBER 因此不知道量适不适合 09/29 13:27
4F：→ gryou:100μL/1 chamber/37度西 incubator 6hr 09/29 13:30
5F：→ gryou:well 跟 well 中间加入 DPBS 使其保湿 09/29 13:30
6F：→ gryou:这是要避免他太乾 形成凸面 这样细胞会分布到管壁旁边！ 09/29 13:32
7F：→ gryou:incubate 完後 加入 10^5 cells/200μL/1 chamber 09/29 13:33
8F：→ gryou:然後置入culture media之中 当然这些过程都是要避免气泡产 09/29 13:34
9F：→ gryou:生的 希望这样是有帮助到你！ 09/29 13:36