作者conan11 (民國的福爾摩斯)
看板Biotech
標題[求救] 關於養細胞的汙染
時間Sun Sep 26 18:47:02 2010
發問時請注意，若是要問實驗相關的問題，請將實驗的步驟、所用的條件大致列出
以方便板友幫您追蹤問題
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最近養的細胞有部分汙染 而且都在繼代培養後3,4天才出現細菌
但是一開始剛繼代完的medium都是很澄清的 當然我看不出汙染也大有可能
這中間當然都沒動過medium 只有拿出來觀察
想請問版友會發生這種養了好幾天才出現汙染的情況嗎？
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.116.94.44
1F：→ mzac1b:我也有這樣的經驗 大約也是3, 4 天 09/26 22:53
2F：→ mzac1b:後來我就細胞養三日必換培養液 想說可能抗生素失效 09/26 22:54
3F：推 takumatw:砍掉重來....最乾脆簡單的方法 09/26 22:56
4F：→ blence:一樓做法不對,細胞沒污染就不會跟有無抗生素有關 09/26 23:01
5F：→ blence:通常會有原po這樣,會跟抗生素有無與濃度有關,即使沒污染,事 09/26 23:02
6F：→ blence:實上都被污染了,只是有抗生素暫時抑制而已,所以可能不適合 09/26 23:05
7F：→ blence:用來實驗 若不加抗生素會更快污染? 還是其實其它人力干擾? 09/26 23:08
8F：推 mattmatt:看抗生素的種類和量囉...抗生素也是會消耗的~ 09/27 00:44
9F：→ mattmatt:器皿/medium或操作汙染還有機會避免..最怕是stock有問題~ 09/27 00:45
10F：→ conan11:謝謝板友的說明 我是有加一倍 stre./pen. 09/27 01:22
11F：→ mzac1b:如果勤換培養液 真能讓抗生素"暫時"壓住細胞污染 有何不可? 09/27 03:55
12F：→ mzac1b:現在作細胞的八成都沒在測黴漿菌了 大多只在乎看的到的污 09/27 03:57
13F：→ blence:你確定"有何不可"？ 像這樣硬撐的,實驗都很不順,像是不好 09/27 09:38
14F：→ blence:transfection或藥物處理反應不佳,最後得去要好的細胞重養 09/27 09:41
15F：推 tsubasawolfy:硬撐的再現性會不好吧...砍掉重練最快 09/27 10:03
16F：→ mzac1b:那要看實驗的等級吧 難道你有在測黴將菌嗎? 09/27 11:25
17F：→ mzac1b:我只聽說過一個中研院的老師有在測黴漿菌 09/27 11:25
18F：→ mzac1b:世界上絕大部分實驗室不都看不到等於沒事 09/27 11:26
19F：→ mzac1b:事實上要監測黴漿菌的話 大部分實驗室都經營不下去了 09/27 11:28
20F：推 bluehero31:不推MZ 其實有很多PAPER會要求你做檢測 09/27 11:30
21F：→ mzac1b:我不是說建議硬撐 污染我也只能砍掉 09/27 11:31
22F：→ mzac1b:我覺得只是等級之差而已 09/27 11:32
23F：→ mzac1b:任何黴漿菌測試都有漏網之魚 也無法保證百分之百 09/27 11:32
24F：→ mzac1b:但是普通小實驗室這樣搞根本沒經費實力去這樣搞 09/27 11:33
25F：→ mzac1b:如果你有經費時間去那樣搞 好確保你的data當然拍拍手 09/27 11:33
26F：→ saviora:黴漿菌可以在做cell bnak的時候檢測一下 09/27 11:33
27F：→ saviora:至少要源頭確保沒事 09/27 11:34
28F：→ mzac1b:如果只有一年一百萬 難道還去測黴漿菌 測到就整批丟? 09/27 11:34
29F：→ saviora:用壓制的方式其實很危險 因為細胞可能已經出問題了 09/27 11:35
30F：→ saviora:做出來的DATA可信度會變差 09/27 11:35
31F：推 celestial318:找不到原因 那就砍掉重練... 09/27 12:16
32F：推 tsubasawolfy:transfection一搞出來不是就要做保存一些了嘛.. 09/27 12:22
33F：推 icome:不加比較好 有汙染馬上就會發現 避免汙染擴大 09/27 21:40
34F：→ icome:抗生素只是暫時壓抑細菌生長 終有一天得到抗藥性就會爆發 09/27 21:41
35F：→ icome:除非是養短期的 加無所謂 maintain的最好不加 確保真的乾淨 09/27 21:45
36F：→ sogfried:現在有可以解決黴漿菌污染的抑黴劑 效果不錯 但不便宜 09/28 17:57
37F：→ sogfried:我用的是跟康寧買的 確實救了我的細胞 09/28 17:58
38F：→ sogfried:黴漿菌污染肉眼無法觀測 細胞也不一定死 但可能影響實驗 09/28 17:59
39F：→ lovesteve:我們也是有在檢測mycoplasma,如果真的細菌污染2X或是4X 09/28 22:28
40F：→ lovesteve:PS加在medium裡面大約3-4天 換成沒有PS的medium 09/28 22:29
41F：→ lovesteve:如果之後都沒污染 應該就比較沒問題了! 有錢還是找ATCC 09/28 22:30
42F：→ lovesteve:殺mycoplasma樓上說的那個雖然貴,但效果好又方便 09/28 22:31