作者conan11 (民国的福尔摩斯)
看板Biotech
标题[求救] 关於养细胞的污染
时间Sun Sep 26 18:47:02 2010
发问时请注意，若是要问实验相关的问题，请将实验的步骤、所用的条件大致列出
以方便板友帮您追踪问题
----请将上列注意事项以 ctrl + k 删除後开始编辑文章----
最近养的细胞有部分污染 而且都在继代培养後3,4天才出现细菌
但是一开始刚继代完的medium都是很澄清的 当然我看不出污染也大有可能
这中间当然都没动过medium 只有拿出来观察
想请问版友会发生这种养了好几天才出现污染的情况吗？
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.116.94.44
1F：→ mzac1b:我也有这样的经验 大约也是3, 4 天 09/26 22:53
2F：→ mzac1b:後来我就细胞养三日必换培养液 想说可能抗生素失效 09/26 22:54
3F：推 takumatw:砍掉重来....最乾脆简单的方法 09/26 22:56
4F：→ blence:一楼做法不对,细胞没污染就不会跟有无抗生素有关 09/26 23:01
5F：→ blence:通常会有原po这样,会跟抗生素有无与浓度有关,即使没污染,事 09/26 23:02
6F：→ blence:实上都被污染了,只是有抗生素暂时抑制而已,所以可能不适合 09/26 23:05
7F：→ blence:用来实验 若不加抗生素会更快污染? 还是其实其它人力干扰? 09/26 23:08
8F：推 mattmatt:看抗生素的种类和量罗...抗生素也是会消耗的~ 09/27 00:44
9F：→ mattmatt:器皿/medium或操作污染还有机会避免..最怕是stock有问题~ 09/27 00:45
10F：→ conan11:谢谢板友的说明 我是有加一倍 stre./pen. 09/27 01:22
11F：→ mzac1b:如果勤换培养液 真能让抗生素"暂时"压住细胞污染 有何不可? 09/27 03:55
12F：→ mzac1b:现在作细胞的八成都没在测霉浆菌了 大多只在乎看的到的污 09/27 03:57
13F：→ blence:你确定"有何不可"？ 像这样硬撑的,实验都很不顺,像是不好 09/27 09:38
14F：→ blence:transfection或药物处理反应不佳,最後得去要好的细胞重养 09/27 09:41
15F：推 tsubasawolfy:硬撑的再现性会不好吧...砍掉重练最快 09/27 10:03
16F：→ mzac1b:那要看实验的等级吧 难道你有在测霉将菌吗? 09/27 11:25
17F：→ mzac1b:我只听说过一个中研院的老师有在测霉浆菌 09/27 11:25
18F：→ mzac1b:世界上绝大部分实验室不都看不到等於没事 09/27 11:26
19F：→ mzac1b:事实上要监测霉浆菌的话 大部分实验室都经营不下去了 09/27 11:28
20F：推 bluehero31:不推MZ 其实有很多PAPER会要求你做检测 09/27 11:30
21F：→ mzac1b:我不是说建议硬撑 污染我也只能砍掉 09/27 11:31
22F：→ mzac1b:我觉得只是等级之差而已 09/27 11:32
23F：→ mzac1b:任何霉浆菌测试都有漏网之鱼 也无法保证百分之百 09/27 11:32
24F：→ mzac1b:但是普通小实验室这样搞根本没经费实力去这样搞 09/27 11:33
25F：→ mzac1b:如果你有经费时间去那样搞 好确保你的data当然拍拍手 09/27 11:33
26F：→ saviora:霉浆菌可以在做cell bnak的时候检测一下 09/27 11:33
27F：→ saviora:至少要源头确保没事 09/27 11:34
28F：→ mzac1b:如果只有一年一百万 难道还去测霉浆菌 测到就整批丢? 09/27 11:34
29F：→ saviora:用压制的方式其实很危险 因为细胞可能已经出问题了 09/27 11:35
30F：→ saviora:做出来的DATA可信度会变差 09/27 11:35
31F：推 celestial318:找不到原因 那就砍掉重练... 09/27 12:16
32F：推 tsubasawolfy:transfection一搞出来不是就要做保存一些了嘛.. 09/27 12:22
33F：推 icome:不加比较好 有污染马上就会发现 避免污染扩大 09/27 21:40
34F：→ icome:抗生素只是暂时压抑细菌生长 终有一天得到抗药性就会爆发 09/27 21:41
35F：→ icome:除非是养短期的 加无所谓 maintain的最好不加 确保真的乾净 09/27 21:45
36F：→ sogfried:现在有可以解决霉浆菌污染的抑霉剂 效果不错 但不便宜 09/28 17:57
37F：→ sogfried:我用的是跟康宁买的 确实救了我的细胞 09/28 17:58
38F：→ sogfried:霉浆菌污染肉眼无法观测 细胞也不一定死 但可能影响实验 09/28 17:59
39F：→ lovesteve:我们也是有在检测mycoplasma,如果真的细菌污染2X或是4X 09/28 22:28
40F：→ lovesteve:PS加在medium里面大约3-4天 换成没有PS的medium 09/28 22:29
41F：→ lovesteve:如果之後都没污染 应该就比较没问题了! 有钱还是找ATCC 09/28 22:30
42F：→ lovesteve:杀mycoplasma楼上说的那个虽然贵,但效果好又方便 09/28 22:31