作者sniker (SNIKER)
看板Biotech
標題[方法] slow-down PCR添加物
時間Wed Sep 1 11:16:41 2010
我想要請問各位分生操作的高手
在做high GC content的PCR時 會採用的slow down PCR技術
添加的
dc7GTP 功能是避免GC過高的片段形成二級結構, hairpin...
那
dc7GTP對後續實驗通常會不會有甚麼影響性 有影響的話大概是怎麼影響 以及怎麼去除
and
如果實驗室沒有dc7GTP 按照protocol上建議可以添加glycerol DMSO
那甘油的作用大概是甚麼阿@@ 會不會影響到後續實驗
DMSO呢 會不會影響到後續實驗
以及甘油跟DMSO有建議的濃度或量嗎
甘油實驗室幾乎都有又便宜 可否以後做slow down都添加甘油就好了不要另外買dc7GTP
謝拉謝拉要靠各位高手幫忙解答了!!!!
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◆ From: 140.112.74.156
1F：→ aggaci:DMSO會增加mutation機率，建議用betaine 09/01 12:50
2F：推 silverberry:我做過85%以上的high GC, 加1%DMSO 25 cycle 勉強挑個 09/02 10:18
3F：→ silverberry:3-5clones 就會有全對的了!不用slow down PCR 09/02 10:18
4F：推 davideason:難搞一點的 3%-5%DMSO可以試試看 09/04 03:25