作者sniker (SNIKER)
看板Biotech
标题[方法] slow-down PCR添加物
时间Wed Sep 1 11:16:41 2010
我想要请问各位分生操作的高手
在做high GC content的PCR时 会采用的slow down PCR技术
添加的
dc7GTP 功能是避免GC过高的片段形成二级结构, hairpin...
那
dc7GTP对後续实验通常会不会有甚麽影响性 有影响的话大概是怎麽影响 以及怎麽去除
and
如果实验室没有dc7GTP 按照protocol上建议可以添加glycerol DMSO
那甘油的作用大概是甚麽阿@@ 会不会影响到後续实验
DMSO呢 会不会影响到後续实验
以及甘油跟DMSO有建议的浓度或量吗
甘油实验室几乎都有又便宜 可否以後做slow down都添加甘油就好了不要另外买dc7GTP
谢拉谢拉要靠各位高手帮忙解答了!!!!
--
※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.112.74.156
1F：→ aggaci:DMSO会增加mutation机率，建议用betaine 09/01 12:50
2F：推 silverberry:我做过85%以上的high GC, 加1%DMSO 25 cycle 勉强挑个 09/02 10:18
3F：→ silverberry:3-5clones 就会有全对的了!不用slow down PCR 09/02 10:18
4F：推 davideason:难搞一点的 3%-5%DMSO可以试试看 09/04 03:25