作者storygirl (織)
看板Biotech
標題[討論] HEK293T疑惑?
時間Wed Sep 1 00:37:03 2010
最近老師想要將實驗室construct的plasmid送到cell line
想讓細胞可以穩定表現送進去的plasmid~但是問題來了
我可以用HEK293T當作我要用的stable cell line嗎?
還是說用HEK293比較好?
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◆ From: 114.44.204.172
1F：推 aggaci:都可以，看你selection要用什麼抗生素，若是G418建議用293 09/01 00:47
2F：→ aggaci:若是其他像是puromycin or hygromycin等，就沒差 09/01 00:47
3F：→ storygirl:感激~~~我剛好是要用puromycin篩選~ 09/01 00:49
4F：推 hurdle:你的plasmid有SV40 ori嗎?? 09/01 08:02
5F：推 leoblack:有large T的293T不是篩不太死嘛?!建議用293比較好吧 09/01 09:22
6F：→ storygirl:我的plasmid有SV40 ori喔 09/01 12:04
7F：推 aggaci:為什麼293T用puromycin篩不死？puromycin很毒ㄝ！ 09/01 12:49
8F：→ aggaci:293T只是抗G418吧 09/01 12:49
9F：推 icome:293T長比較快會比較好上手 09/01 17:19
10F：推 hurdle:既然有SV40 ori,如果妳要讓妳的plasmid integrate到 09/02 02:49
11F：→ hurdle:chromosome裡, 建議用HEK293. 因為LTag會replicate妳的 09/02 02:51
12F：→ hurdle:plasmid. 09/02 02:51
13F：推 robertkoch:plasmid 的品系稍微說明一下,不同 plasmid 用不用"T"差 09/04 15:46
14F：→ robertkoch:異很大 09/04 15:46
15F：→ robertkoch:一般 plasmid 不是隨隨便便就會 09/04 15:47
16F：→ robertkoch:integration into chromosome 09/04 15:47
17F：→ robertkoch:我的情況是利用 293T 產 plasmid 上的 lentiviruses 09/04 15:47
18F：→ robertkoch:由於這個 plasmid 用的是 SV40 系的 09/04 15:47
19F：→ robertkoch:virus replication 系統 所以必須用 293T 09/04 15:48
20F：→ robertkoch:但產出的 lentiviruses 的 genome 會自行 integration 09/04 15:48
21F：→ robertkoch:into chromosome 09/04 15:49
22F：→ robertkoch:所以幾乎啥人類細胞都可以 09/04 15:49