作者storygirl (织)
看板Biotech
标题[讨论] HEK293T疑惑?
时间Wed Sep 1 00:37:03 2010
最近老师想要将实验室construct的plasmid送到cell line
想让细胞可以稳定表现送进去的plasmid~但是问题来了
我可以用HEK293T当作我要用的stable cell line吗?
还是说用HEK293比较好?
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◆ From: 114.44.204.172
1F：推 aggaci:都可以，看你selection要用什麽抗生素，若是G418建议用293 09/01 00:47
2F：→ aggaci:若是其他像是puromycin or hygromycin等，就没差 09/01 00:47
3F：→ storygirl:感激~~~我刚好是要用puromycin筛选~ 09/01 00:49
4F：推 hurdle:你的plasmid有SV40 ori吗?? 09/01 08:02
5F：推 leoblack:有large T的293T不是筛不太死嘛?!建议用293比较好吧 09/01 09:22
6F：→ storygirl:我的plasmid有SV40 ori喔 09/01 12:04
7F：推 aggaci:为什麽293T用puromycin筛不死？puromycin很毒ㄝ！ 09/01 12:49
8F：→ aggaci:293T只是抗G418吧 09/01 12:49
9F：推 icome:293T长比较快会比较好上手 09/01 17:19
10F：推 hurdle:既然有SV40 ori,如果你要让你的plasmid integrate到 09/02 02:49
11F：→ hurdle:chromosome里, 建议用HEK293. 因为LTag会replicate你的 09/02 02:51
12F：→ hurdle:plasmid. 09/02 02:51
13F：推 robertkoch:plasmid 的品系稍微说明一下,不同 plasmid 用不用"T"差 09/04 15:46
14F：→ robertkoch:异很大 09/04 15:46
15F：→ robertkoch:一般 plasmid 不是随随便便就会 09/04 15:47
16F：→ robertkoch:integration into chromosome 09/04 15:47
17F：→ robertkoch:我的情况是利用 293T 产 plasmid 上的 lentiviruses 09/04 15:47
18F：→ robertkoch:由於这个 plasmid 用的是 SV40 系的 09/04 15:47
19F：→ robertkoch:virus replication 系统 所以必须用 293T 09/04 15:48
20F：→ robertkoch:但产出的 lentiviruses 的 genome 会自行 integration 09/04 15:48
21F：→ robertkoch:into chromosome 09/04 15:49
22F：→ robertkoch:所以几乎啥人类细胞都可以 09/04 15:49