作者homer0331 (Homer)
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標題[求救] smooth muscle cell primary culture
時間Sat Aug 28 22:12:45 2010
我是做 primary culture 的新手
最近老闆要我以不同paper步驟的差異性
找出最佳的細胞數和去除其他細胞的條件
我的細胞是平滑肌細胞
做法是這樣的
小腸取一段後
泡在冰的 HBSS 直接進入實驗
我先將小腸剪成長條
用棉花棒去除黏膜纖毛
然後剪碎後用collagenase II 切一個小時後
再用100um的濾膜濾掉殘渣
再用HBSS洗後加入medium 每天換一次培養液
問題來了
我發現我兩次做出來兩天後都沒有細胞 但是都有很奇怪的殘渣和懸浮物
是我哪一個環節有問題嗎
以前的助理都做的出來
但是他7天才有9000顆細胞
我都沒有半顆
還有想請問各位每次primary取得的細胞數不是差異都會很大嗎
因為我覺得我老闆的想法有點不太能了解
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◆ From: 218.167.57.241
1F：推 onlyone0419:你要等細胞鑽出來...我實驗室同學之前坐小鼠血管smc 08/29 02:30
2F：→ onlyone0419:成功率不高...加油啊@@ 08/29 02:30