作者homer0331 (Homer)
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标题[求救] smooth muscle cell primary culture
时间Sat Aug 28 22:12:45 2010
我是做 primary culture 的新手
最近老板要我以不同paper步骤的差异性
找出最佳的细胞数和去除其他细胞的条件
我的细胞是平滑肌细胞
做法是这样的
小肠取一段後
泡在冰的 HBSS 直接进入实验
我先将小肠剪成长条
用棉花棒去除黏膜纤毛
然後剪碎後用collagenase II 切一个小时後
再用100um的滤膜滤掉残渣
再用HBSS洗後加入medium 每天换一次培养液
问题来了
我发现我两次做出来两天後都没有细胞 但是都有很奇怪的残渣和悬浮物
是我哪一个环节有问题吗
以前的助理都做的出来
但是他7天才有9000颗细胞
我都没有半颗
还有想请问各位每次primary取得的细胞数不是差异都会很大吗
因为我觉得我老板的想法有点不太能了解
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◆ From: 218.167.57.241
1F：推 onlyone0419:你要等细胞钻出来...我实验室同学之前坐小鼠血管smc 08/29 02:30
2F：→ onlyone0419:成功率不高...加油啊@@ 08/29 02:30