作者boblu (六百)
看板Biotech
標題Re: [討論] 有關E.coli是否會踢掉plasmid的問題
時間Sun Aug 15 13:59:48 2010
其實我不懂的是原 po 挑出 colonies 以後為什麼用 LB only 養？
不是 transform 以後就跟 amp (或是carb) 生生世世不分離了嗎？
另外 挑出的 colonies 與其養在 LB 裡
我也比較喜歡先畫 patch plate
雖然要等他長的時間比較長 但是操作／保存都方便
我習慣的流程是：
第一天下午 transform
第二天早上挑 colony, 畫 patch plate
第二天下午下班前上 PCR
第三天上午跑 gel
（如果要抽 midi, 跑玩膠馬上先養一個小量）
第三天下午下班前挑要的菌株 養適量
第四天上午抽 plasmid
要省一天的話，第二天下班前就先把所有 patch plate 上的都養小量
第三天 run PCR product on gel 的時候就可以把菌離心下來冰 -20
跑完就知道哪幾支有東西 再把相對應的 已經離下來的菌拿去抽 plasmid
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◆ From: 71.10.75.57
1F：推 yaliu:其實也不用急著冰啦～基本上我放過12～3天的，也是抽的出來 08/15 19:11
2F：→ yaliu:有時還放室溫勒....... 08/15 19:11
3F：→ boblu:有冰有安心嘛 :p 08/16 10:11