作者boblu (六百)
看板Biotech
标题Re: [讨论] 有关E.coli是否会踢掉plasmid的问题
时间Sun Aug 15 13:59:48 2010
其实我不懂的是原 po 挑出 colonies 以後为什麽用 LB only 养？
不是 transform 以後就跟 amp (或是carb) 生生世世不分离了吗？
另外 挑出的 colonies 与其养在 LB 里
我也比较喜欢先画 patch plate
虽然要等他长的时间比较长 但是操作／保存都方便
我习惯的流程是：
第一天下午 transform
第二天早上挑 colony, 画 patch plate
第二天下午下班前上 PCR
第三天上午跑 gel
（如果要抽 midi, 跑玩胶马上先养一个小量）
第三天下午下班前挑要的菌株 养适量
第四天上午抽 plasmid
要省一天的话，第二天下班前就先把所有 patch plate 上的都养小量
第三天 run PCR product on gel 的时候就可以把菌离心下来冰 -20
跑完就知道哪几支有东西 再把相对应的 已经离下来的菌拿去抽 plasmid
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◆ From: 71.10.75.57
1F：推 yaliu:其实也不用急着冰啦～基本上我放过12～3天的，也是抽的出来 08/15 19:11
2F：→ yaliu:有时还放室温勒....... 08/15 19:11
3F：→ boblu:有冰有安心嘛 :p 08/16 10:11