作者azywu ()
看板Biotech
標題Re: [求救] BCA與Bio-Rad protein assay kit....
時間Fri Aug 13 13:05:50 2010
※ 引述《Fourfish (～四條魚～)》之銘言：
先感謝四條魚一同來討論~
: 不知道你用BCA測的很高是有多高？
: 你應該有換算出sample的濃度吧？
我之所以沒有辦法換算出濃度是因為超過我自製的檢量線範圍了，
我所配置的檢量線並不是參照說明書上的做到1500 ug/ml
而是先做到500 ug/ml，在這個濃度下BCA的吸光值是0.772，
而我後續有些蛋白質的分析中，吸光值都已經破2.0了，
當然我知道這樣的相對比較並不準確，
不過至少濃度應該是有超過500 ug/ml的。
: 就你所說得靈敏度來看
: BCA: 0-100 ug/ml
: Bio-Rad: 200-900 ug/ml
: 中間100-200很明顯有個落差在
: 如果sample有110 ug/ml或190 ug/ml
: 對BCA來說都是爆表 但對Bio-Rad來說都是不足量
: 所以你怎麼會覺得sample的濃度不會低於Bio-Rad的最低極限200 ug/ml？
很不好意思我在描述上可能會造成誤導，BCA超過100 ug/ml並不會爆表，
我只是想要描述BCA這個Kit在低濃度也有很好的線性關係，
這點是Bio-Rad Kit不敢保證的部份，所以他最低建議 200 ug/ml，
同上面解釋過的，我想我感到疑惑的部分應該不是落在那個模糊的濃度區間內。
: 還有 實驗做法可以再說明清楚一點
: 因為就算是同一套測濃度的試劑
: 裡面也有不同的做法 大量跟微量的做法是有差異的
我有注意到兩個Kit中都有提到試管跟微盤的分析方式，
我兩者都是採用試管分析的方式來做比較的，不過結果卻有天大的差異，
真的讓我相當苦惱....
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