作者azywu ()
看板Biotech
标题Re: [求救] BCA与Bio-Rad protein assay kit....
时间Fri Aug 13 13:05:50 2010
※ 引述《Fourfish (～四条鱼～)》之铭言：
先感谢四条鱼一同来讨论~
: 不知道你用BCA测的很高是有多高？
: 你应该有换算出sample的浓度吧？
我之所以没有办法换算出浓度是因为超过我自制的检量线范围了，
我所配置的检量线并不是参照说明书上的做到1500 ug/ml
而是先做到500 ug/ml，在这个浓度下BCA的吸光值是0.772，
而我後续有些蛋白质的分析中，吸光值都已经破2.0了，
当然我知道这样的相对比较并不准确，
不过至少浓度应该是有超过500 ug/ml的。
: 就你所说得灵敏度来看
: BCA: 0-100 ug/ml
: Bio-Rad: 200-900 ug/ml
: 中间100-200很明显有个落差在
: 如果sample有110 ug/ml或190 ug/ml
: 对BCA来说都是爆表 但对Bio-Rad来说都是不足量
: 所以你怎麽会觉得sample的浓度不会低於Bio-Rad的最低极限200 ug/ml？
很不好意思我在描述上可能会造成误导，BCA超过100 ug/ml并不会爆表，
我只是想要描述BCA这个Kit在低浓度也有很好的线性关系，
这点是Bio-Rad Kit不敢保证的部份，所以他最低建议 200 ug/ml，
同上面解释过的，我想我感到疑惑的部分应该不是落在那个模糊的浓度区间内。
: 还有 实验做法可以再说明清楚一点
: 因为就算是同一套测浓度的试剂
: 里面也有不同的做法 大量跟微量的做法是有差异的
我有注意到两个Kit中都有提到试管跟微盘的分析方式，
我两者都是采用试管分析的方式来做比较的，不过结果却有天大的差异，
真的让我相当苦恼....
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