作者aggaci (台南工作的基隆人)
看板Biotech
標題DH5alpha 是否 不能用來增值lentivirus plasmid？
時間Tue Aug 10 12:04:54 2010
我最近想來建立我們lab的lentivirus system
先以GFP來看，tranduction efficiency還不差，約70%以上
我很有興趣再往下做(因為我的細胞很難做transfection)
但當我作到把我的ligation後的lentivirus plasmid用DH5alpha heat shock
但colony1抽出來的DNA digestion後size完全不對！！
同樣情形也發生在另一個人身上！
看了板上一些文章發現有可能是DH5alpha的問題
有人建議該用stbl3
本來想買的，後來這株菌又貴沒現貨 最重要的是要申請公文
太浪費時間了！
所以想請教板友們，是否有stbl3可以分一些給我
我自己來擴大作competent cell........
謝謝！
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.116.253.121
※ 編輯: aggaci 來自: 140.116.253.121 (08/10 12:08)
1F：推 pelagic:跟我的情形一樣 我也想要增求一點 謝謝~~~ 08/10 12:59
2F：推 williamyang:請問你在哪呢?中研院的話就還有辦法 08/10 13:35
3F：推 aceliang:stbl3很貴哪...先用XL-1 blue撐著先 08/10 13:46
4F：→ lovesteve:XL-1b 可以用 我試過了~ 08/10 14:00
5F：推 tmrou:我們用DH5 alpha有做出來, 不過長比較慢,colony較小. 08/11 00:25
6F：推 icome:可以直接跟RNAi core要 08/11 10:57
7F：→ aggaci:ㄜ 中研院說沒有哩 = =||| 08/11 11:45
8F：→ aggaci:我在台南說~~ 08/11 11:45
9F：→ icome:是喔 給我的人說他是跟中研院拿的~ 08/11 11:49
10F：→ aggaci:樓上大哥!stbl3就拜託您了 謝謝 08/11 12:14