作者aggaci (台南工作的基隆人)
看板Biotech
标题DH5alpha 是否 不能用来增值lentivirus plasmid？
时间Tue Aug 10 12:04:54 2010
我最近想来建立我们lab的lentivirus system
先以GFP来看，tranduction efficiency还不差，约70%以上
我很有兴趣再往下做(因为我的细胞很难做transfection)
但当我作到把我的ligation後的lentivirus plasmid用DH5alpha heat shock
但colony1抽出来的DNA digestion後size完全不对！！
同样情形也发生在另一个人身上！
看了板上一些文章发现有可能是DH5alpha的问题
有人建议该用stbl3
本来想买的，後来这株菌又贵没现货 最重要的是要申请公文
太浪费时间了！
所以想请教板友们，是否有stbl3可以分一些给我
我自己来扩大作competent cell........
谢谢！
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.116.253.121
※ 编辑: aggaci 来自: 140.116.253.121 (08/10 12:08)
1F：推 pelagic:跟我的情形一样 我也想要增求一点 谢谢~~~ 08/10 12:59
2F：推 williamyang:请问你在哪呢?中研院的话就还有办法 08/10 13:35
3F：推 aceliang:stbl3很贵哪...先用XL-1 blue撑着先 08/10 13:46
4F：→ lovesteve:XL-1b 可以用 我试过了~ 08/10 14:00
5F：推 tmrou:我们用DH5 alpha有做出来, 不过长比较慢,colony较小. 08/11 00:25
6F：推 icome:可以直接跟RNAi core要 08/11 10:57
7F：→ aggaci:ㄜ 中研院说没有哩 = =||| 08/11 11:45
8F：→ aggaci:我在台南说~~ 08/11 11:45
9F：→ icome:是喔 给我的人说他是跟中研院拿的~ 08/11 11:49
10F：→ aggaci:楼上大哥!stbl3就拜托您了 谢谢 08/11 12:14