作者sarahls (~sarah~)
看板Biotech
標題[問題]GST純化的resin
時間Mon Aug 9 23:26:37 2010
我想請問純化GST蛋白的resin大家會重複使用嗎???
如果是不同的蛋白
會不會重新配製呢?(因為怕污染這樣!!??)
雖然說有regeneration這個步驟
那是不是就乾淨了呢?
可以繼續使用
不同蛋白也沒關係??
因為有學長講說怕汙染
所以一直重配@@
那不就都不用regeneration
用過就換掉~這樣是不是太浪費???
另外
我再問一下~有人用pQE30作為表現蛋白的系統嗎??
因為我一直找不到好的誘導條件ˊˋ
網路上查的也一直在try~~
也都沒比較明顯的band> <
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 114.27.190.165
1F：推 kalfan1:不放心就多洗幾次 如果未來是要跑western這種條帶 08/09 23:35
2F：→ kalfan1:會分開的 那有其他蛋白存在也沒有關係 08/09 23:36
3F：→ kalfan1:你純化前不就是有無數種蛋白質 08/09 23:36
4F：→ sarahls:可是我純化完是要直接送去做抗體的耶~而且我怕汙染的是上 08/09 23:47
5F：→ sarahls:一個不同GST蛋白的東西壓~~ 08/09 23:48
6F：推 a001ou:如果真的不放心 那就跑一片western膠染comassive blue 08/10 02:17
7F：→ a001ou:就知道洗的到底乾不乾淨 08/10 02:17
8F：推 tsubasawolfy:單純HIS純化完+濃縮如果可以得到很好的single band 08/10 11:08
9F：→ tsubasawolfy:算運氣好..通常都還要過gel filtration拿到更純的 08/10 11:09
10F：推 bluecsky:是有洗的這麼不乾淨嗎 囧 再說你一般存resin的條件下 08/11 03:35
11F：→ bluecsky:蛋白也不會stable到哪去 而且大多不會一個tag就拿到純的 08/11 03:35
12F：→ bluecsky:大不了同一種蛋白就一直重複用那一批resin 不夠再拿新的 08/11 03:35
13F：→ bluecsky:補一點 有做好wash跟regeneration 可以用很久的 08/11 03:36